按照襄江大道鱼梁洲隧道设计要求，隧道内限高3米、限重40吨、限速60km/h、限宽3.75米，市民在前往时应先确认车辆是否符合通行要求。鱼梁洲隧道每日0时至6时禁止通行。
隧道内禁止行人和下列车辆通行：自行车、电动自行车、三轮车等非机动车；货车、摩托车、拖拉机、农用车、轮式和履带式专用机械车辆；超过隧道限载量、限高度、限宽度标准的车辆；运载爆炸物品、易燃易爆化学物品及剧毒、放射性等危险物品的车辆；其他影响或者危及隧道安全的车辆。特种车辆不受通行限制。
另外，禁止在隧道内停车；在隧道进出口及实线段，严禁车辆变更车道，禁止压越实线及出入口标线行驶；隧道内虚线段，禁止车辆一次连续变更2条以上车道。